Résumé:
Les amylases sont les principales enzymes impliquées dans la dégradation de
l’amidon. Ces enzymes possèdent divers applications c’est pourquoi elles sont très
recherchées dans le domaine industriel. Dans cette étude, 100 souches bactériennes
appartenant au genre Bacillus, isolées à partir de différentes niches écologiques, de
sources thermales dans le territoire Algérien ont sélectionnées sur la base de leurs
capacités de dégradation d’amidon et production des amylases sur le milieu de culture
Starch agar, additionnée d’une concentration de 1% d’amidon.
La sélection des souches productrices des amylases est établie en s’appuyant sur
deux critères essentiels : la mesure des diamètres des zones d’hydrolyses formées sur
milieu de culture solide et le test de l’activité de dextrinisation dans un milieu de
culture liquide par la méthode DNSA. La mise en évidence de la thermostabilité des
amylases est effectuée par l’étude de l’influence de la température sur l’activité
amylolytique. Les résultats obtenus ont montré que la souche MK7 sélectionnée
productrice de l’amylase a présenté une activité enzymatique maximale de (1,537
U/ml). L’utilisation de la galerie API 20E et l’analyse par le logiciel Bacterial
identification program ont permis l’identification de cette espèce comme étant Bacillus
subtilis. Les tests de la thermostabilité effectués ont révélé la présence de quatre
souches productrices d’amylases hautement résistantes (HC2, HBH2, HBH5 et HBH),
avec des températures optimales de (85, 80, 75, 75°C) respectivement. L’utilisation de
l’outil de la biologie moléculaire a permis une identification génétique des souches
sélectionnées productrices d’amylases et l’analyse phylogénétique.
Dans le but d’augmenter la production des amylases chez la souche
sélectionnée productrice MK7, un certain nombre de paramètres tels que la source
d’azote, la concentration de l’inoculum, la concentration d’amidon et l’effet de
quelques sels minéraux ont été optimisés. Les résultats obtenus ont montré qu’une
production maximale des amylases (11,746 U/ml) est obtenue lors de l’inoculation de
la souche MK7 sur un milieu de culture optimisé contenant amidon 5g/l, gélatine 5g/l,
CaCl2 ; 0.2 g/l et 0.5% v/v d’inoculum.
