Isolement et caractérisation des bactéries à intérêts biotechnologiques à partir de niches écologiques Algériennes

Abstract

Les amylases sont les principales enzymes impliquées dans la dégradation de l’amidon. Ces enzymes possèdent divers applications c’est pourquoi elles sont très recherchées dans le domaine industriel. Dans cette étude, 100 souches bactériennes appartenant au genre Bacillus, isolées à partir de différentes niches écologiques, de sources thermales dans le territoire Algérien ont sélectionnées sur la base de leurs capacités de dégradation d’amidon et production des amylases sur le milieu de culture Starch agar, additionnée d’une concentration de 1% d’amidon. La sélection des souches productrices des amylases est établie en s’appuyant sur deux critères essentiels : la mesure des diamètres des zones d’hydrolyses formées sur milieu de culture solide et le test de l’activité de dextrinisation dans un milieu de culture liquide par la méthode DNSA. La mise en évidence de la thermostabilité des amylases est effectuée par l’étude de l’influence de la température sur l’activité amylolytique. Les résultats obtenus ont montré que la souche MK7 sélectionnée productrice de l’amylase a présenté une activité enzymatique maximale de (1,537 U/ml). L’utilisation de la galerie API 20E et l’analyse par le logiciel Bacterial identification program ont permis l’identification de cette espèce comme étant Bacillus subtilis. Les tests de la thermostabilité effectués ont révélé la présence de quatre souches productrices d’amylases hautement résistantes (HC2, HBH2, HBH5 et HBH), avec des températures optimales de (85, 80, 75, 75°C) respectivement. L’utilisation de l’outil de la biologie moléculaire a permis une identification génétique des souches sélectionnées productrices d’amylases et l’analyse phylogénétique. Dans le but d’augmenter la production des amylases chez la souche sélectionnée productrice MK7, un certain nombre de paramètres tels que la source d’azote, la concentration de l’inoculum, la concentration d’amidon et l’effet de quelques sels minéraux ont été optimisés. Les résultats obtenus ont montré qu’une production maximale des amylases (11,746 U/ml) est obtenue lors de l’inoculation de la souche MK7 sur un milieu de culture optimisé contenant amidon 5g/l, gélatine 5g/l, CaCl2 ; 0.2 g/l et 0.5% v/v d’inoculum.